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人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒的樣品收集₪₪◕、處理及儲存方法

釋出時間↟✘:2022-10-23   點選次數↟✘:47次
   人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒採用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)₪☁。往預先包被人封閉抗體(BA)捕獲抗體的包被微孔中✘☁,依次加入標本₪₪◕、標準品₪₪◕、HRP標記的檢測抗體✘☁,經過溫育並*洗滌₪☁。用底物TMB顯色✘☁,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色✘☁,並在酸的作用下轉化成最終的黃色₪☁。顏色的深淺和樣品中的人封閉抗體(BA)呈正相關₪☁。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)✘☁,計算樣品濃度₪☁。
  
  樣品收集₪₪◕、處理及儲存方法↟✘:
  1₪₪◕、血清↟✘:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液後,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離₪☁。
  2₪₪◕、血漿↟✘:EDTA₪₪◕、檸檬酸鹽或肝素抗凝₪☁。3000轉離心30分鐘取上清₪☁。
  3₪₪◕、細胞上清液↟✘:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物₪☁。
  4₪₪◕、組織勻漿↟✘:將組織加入適量生理鹽水搗碎₪☁。3000轉離心10分鐘取上清₪☁。
  5₪₪◕、儲存↟✘:如果樣本收集後不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存於-20℃,避免反覆凍融,在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍₪☁。
  
  人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒操作注意事項↟✘:
  1₪₪◕、試劑盒儲存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘₪☁。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬於正常現象,水浴加熱使結晶*溶解後再使用₪☁。
  2₪₪◕、實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫乾燥)儲存₪☁。
  3₪₪◕、濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,最終結果乘以5才是樣本實際濃度₪☁。
  4₪₪◕、嚴格按照說明書中標明的時間₪₪◕、加液量及順序進行溫育操作₪☁。
  5₪₪◕、所有液體組分使用前充分搖勻₪☁。
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