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關於雞ELISA試劑盒╃◕,那些不得不說的事

釋出時間││₪╃▩:2021-09-15   點選次數││₪╃▩:317次
   雞ELISA試劑盒溶菌酶可與等電點較低的蛋白有強的結合能力✘·╃。免疫球蛋白等電點約為5╃◕,因此╃◕,在雙抗體夾心法ELISA試劑盒測定中╃◕,溶菌酶可在包被的IgG和酶標的IgG間形成橋接╃◕,從而導致假陽性✘·╃。因此╃◕,為保證ELISA試劑盒測定的可靠性╃◕,有必要從標本中去除溶菌酶或將其封閉╃◕,Cu2+離子和卵白蛋白可有效地封閉溶菌酶╃◕,防止其連線IgG✘·╃。
  Elisa生物試驗是一種敏感性高╃◕,特異性強╃◕,重複性好的實驗診斷方法✘·╃。由於其試劑穩定₪☁•₪☁、易儲存╃◕,操作簡便╃◕,結果判斷較客觀等因素╃◕,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中✘·╃。
  雞ELISA試劑盒由補體引起的干擾可透過下述方法避免││₪╃▩:
  (1)對臨床血清標本加熱滅活補體││₪╃▩:採用56~C30 min加熱可使標本中的補體C1✘·╃。滅活✘·╃。
  (2)包被或酶標二抗使用特異的雞抗體││₪╃▩:雞抗體不啟用人的補體系統╃◕,因此╃◕,使用特異的雞抗體╃◕,不會出現因補體啟用而存在的假陽性和假陰性干擾✘·╃。
  異嗜性抗體人類血清中含有抗齧齒類動物(如鼠₪☁•₪☁、馬₪☁•₪☁、羊等)的免疫球蛋白(1g)的抗體╃◕,即天然的異嗜性抗體✘·╃。有研究表明╃◕,天然的異嗜性抗體(1gG)可分為兩類╃◕,一類(85%的假陽性由其引起)可結合于山羊₪☁•₪☁、小鼠₪☁•₪☁、大鼠₪☁•₪☁、馬和牛IgG的Fab區域╃◕,但不與兔IgG的Fab區結合✘·╃。另一類(15%的假陽性由其引起)可結合於小鼠₪☁•₪☁、馬₪☁•₪☁、牛和兔IgG的Fc區表位╃◕,但不與山羊和大鼠IgG的Pc區表位結合✘·╃。異嗜性抗體可透過交聯固相和酶標的單抗或多抗而出現假陽性反應✘·╃。
  雞ELISA試劑盒由異嗜性抗體引起的干擾可透過下述方法避免││₪╃▩:
  (1)該試劑盒使用特異的兔F(ab’)2✘·╃。片段作為固相或測定酶標抗體✘·╃。
  (2)在標本或標本稀釋液中加入過量的動物Ig╃◕,封閉可能存在的異嗜性抗體✘·╃。但加入量不足或亞類不同時無效✘·╃。
  (3)使用靶特異的非Ig親和蛋白替代固相或酶標抗體之一✘·╃。採用噬菌體展示技術展示來自單個金黃色葡萄球菌A蛋白(SPA)聯合文庫的人IgA結合親和蛋白╃◕,用於IgA的測定╃◕,不受異嗜性抗體的影響✘·╃。
  (4)使用特異的雞抗體作為固相和測定抗體✘·╃。
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